Semasa wabak ZIKV telah menekankan batasan utama teknologi diagnostik yang sedia ada. Barré 2, yang boleh menyerang individu pada sebarang usia, meninggalkan kumpulan-kumpulan penduduk yang banyak risiko yang lebih tinggi jika dijangkiti. Confounding ini adalah hakikat bahawa tempahan individu yang dijangkiti kekal asimptomatik, yang membentangkan cabaran tambahan untuk menghadkan penyebaran virus. Manakala kebanyakan arboviruses berfikir untuk menyebarkan secara eksklusif antara vektor tersebut dan tuan rumah, ZIKV mempunyai keupayaan untuk merebak melalui cecair badan termasuklah darah, air liur, air mani dan air kencing 3 ini boleh membantu virus merebak lebih cepat daripada yang disangka sebelum ini. Hakikat bahawa jangkitan dengan Zika, Denggi dan chikungunya virus hasil simptom yang sama, termasuk demam, ruam, dan bersama kesakitan, merumitkan diagnosis pembezaan.
Permohonan penjagaan, membataskan penggunaan mereka secara meluas. berasaskan sistem pengesanan ke arah lebih padat, mudah alih dan murah medan deployable sistem 7, 8, 9, 10. LAMPU pengesanan virus Zika 13. atau melaksanakan jel untuk menganalisis banding dengan pola 11. Isothermal NAATs menghapuskan keperluan untuk kuasa cyclers haba lapar, ketara mengurangkan kerumitan perkakasan yang diperlukan untuk ujian ini. telah muncul sebagai NAAT isothermal yang popular untuk mengesan virus disebabkan oleh pengurusan haba yang dipermudahkan dan kepekaan yang tinggi dan spesifikasi ke arah sasaran urutan 11, 12, 13, 14. positif amplifications, dan menawarkan keupayaan untuk multiplex sasaran dua atau lebih satu tindak balas. Ciri-ciri ini mengurangkan kos reagent dan pencairan apabila jumlah sampel menghadkan. Powered modul isothermal Pemanas dan modul excitation LED multicolor melalui Bluetooth. algoritma pengesanan berasaskan mampu mengesan multiplexed QUASR cerakin isyarat dengan ketepatan yang lebih besar daripada analisis keamatan imej yang konvensional. LAMPU aktiviti di bawah CHIKV dan DENV 17, 19, 22. teknik mengesan titik tamat QUASR tertentu.
Teknik-teknik pengesanan lampu sebelum ini telah diterangkan secara terperinci 22. Kami menyediakan standard ZIKV RNA dari ZIKV yang berbudaya. LAMPU aktiviti di bawah sepanjang kajian ini. Walau bagaimanapun, sistem ini hanya boleh mengesan jumlah pilihannya dan tidak sesuai dengan aktiviti di bawah multiplexed.
Sayuran, menggunakan satu synthesized DNA standard, dan Vero your plak aktiviti di bawah. atau Cucian reagen, iaitu ciri-ciri utama untuk meningkatkan kerelevanan klinikal yang NAAT. Cerakin lampu untuk ZIKV menggunakan penunjuk crystal violet leuco 13. genom rasa positif RNA yang dipelihara di seluruh keturunan Asia daripada ZIKV. UTR supaya calon-calon yang baik untuk Reka bentuk asas 23. Quencher RQ hitam Iowa. Speaker reaksi muncul bukannya gelap sepenuhnya.
set asas dengan cepat dan boleh dipercayai dikesan ZIKV RNA. UTR dijangka akan amat terpelihara. masa pemantauan oleh 9 SYTO, yang fluoresces hijau atas intercalation ke dsDNA. Aktiviti di bawah lampu untuk CHIKV dan DENV adalah begitu pesat dan sensitif dalam tangan kita berbanding Sastera 17, 19. virus berbudaya berpendua dicairkan ke dalam penimbal Tris. LAMPU adalah bahawa ia adalah mungkin untuk terus mengesan patogen yang utuh tanpa pertama melakukan perahan asid nukleik.
Campuran tindak balas lampu mungkin lebih rendah daripada had pengesanan oleh lagi mengganggu struktur virus dan melepaskan RNA dari capsid virus tersebut. Cerakin lampu adalah sesuai untuk terus pilihannya isothermal daripada ZIKV yang utuh, yang ketara memudahkan penyediaan sampel yang diperlukan. stabil untuk pengagihan dalam ketiadaan satu rantaian sejuk. bersama-sama dengan campuran proprietari penstabilan dari Biomatrica, Inc. 1 tanpa penolakan latar belakang. setaraf bagi reaksi lampu.
Isyarat terang titik tamat yang dihasilkan oleh QUASR permit pengesanan oleh mata atau optik yang mudah, seperti kamera telefon pintar. sasaran asas, jadi serupa cerakin prestasi yang diharapkan. LAMPU atau NAATs lain.
Virus ensefalitis Jepun, WNV, SLEV, sindbis virus atau manusia RNA 17, 19. mismatches di NS5 rangsangan ekonomi rantau ini dan tidak akan mengharapkan ini mengasingkan untuk menguatkan. dan WNV, dan pilihannya tidak berlaku. diagnosis penjagaan ZIKV.
kepekatan merasa, walaupun ditanggung oleh satu prosedur yang lebih kompleks. LAMPU akan tahan perencatan oleh bahan-bahan dalam sampel klinikal matriks. Kapasiti untuk mengesan ZIKV mentah matriks klinikal manusia tanpa tidak atau perahan. LAMPU ini dapat mengendalikan beberapa virus tanpa pengekstrakan RNA yang kerana suhu tindak balas yang cukup tinggi untuk membolehkan asas dan enzim untuk mengakses RNA virus tersebut tanpa melaksanakan langkah tidak berasingan sebelum menambah enzim tersebut.
ml masuk matriks klinikal. ml, iaitu dalam julat rendah kepekatan virus yang diperhatikan dalam spesimen dari pesakit-pesakit penyakit Zika 24. ditentukan dalam masa sebenar oleh SYTO 62, diperlahankan di matriks kompleks. Cerakin lampu ZIKV adalah ideal untuk ujian klinikal berkaitan dengan sekurang-kurangnya atau tiada penyediaan sampel.
Pengesanan QUASR membolehkan titik tamat yang jelas dan tepat diskriminasi hadapan matriks sampel mentah, bahkan seluruh darah selepas tempoh tindak balas kepada suhu bilik. QUASR tidak dapat mengesan sebarang positif palsu dalam reaksi NTC. berdasarkan nilai NTC sampel air liur. daripada keseluruhan darah mengikut prosedur tidak sel darah merah mudah 27. ditanggung patogen 28, 29. LAMPU mengekalkan kepekaan di matriks mentah. Sampel berduri mudah kami mungkin akan tidak sempurna model spesimen klinikal daripada jangkitan flavivirus. dengan minimum menambah kerumitan kepada protokol.
Sebaliknya, isothermal NAAT peranti mengeksploitasi setups Pemanas mudah. Sistem pengurusan haba di cyclers haba yang tersedia secara komersil akan sering kompleks disebabkan pemasangan susur pesat kadar Peltier haba blok diperlukan untuk cepat dan tepat haba Berbasikal. Sebaliknya, isothermal Pemanas sering memerlukan mencorakkan tindak-balas tersuai, seperti cip Mikrofluidik atau ditukarkan PCR tiub, yang boleh memuatkan sampel merumitkan atau membekalkan pengurusan rantaian 13, 30. watt RGB LED berserta dengan turas laluan band multi RGB memastikan sumber excitation sempit reagen cerakin. Pengesan bersepadu ini merakam isyarat ini menghindarkan kalajengking dari tersebar keluar dari cerakin asid nukleik dari masa ke masa, dan pemproses yang terbina atau komputer teman menganalisis data ini menghindarkan kalajengking dari. Reagen yang terang akan ditangkap oleh kamera telefon pintar yang dilengkapi dengan penapis untuk pelepasan boleh ditukar ganti dan imej-imej akan dianalisis seterusnya.
Aplikasi telefon pintar secara wayarles actuates isothermal Pemanas dan RGB LED excitation sumber bagi membolehkan masa sebenar pemantauan dan perubahan suhu Pemanas bersama-sama dengan pencahayaan sampel dengan sumber lampu excitation sesuai. percuma pengesanan 43, 44. Unit kamera tertanam bersama-sama dengan keupayaan pengkomputeran maju telah membuat telefon pintar popular di bio sensing sebagai alternatif kepada mikroskop dan pengesan foton. wawasan, gamut warna kelihatan, julat warna yang dinamik dan sensitiviti foton Retina adalah parameter yang berbeza-beza dari mata ke mata 31, 32. akan mengurangkan keluk pembelajaran perisian dan mengurangkan keperluan untuk pengguna baru untuk membiasakan diri dengan operasi instrumen.
Perubahan warna dalam teknik pengesanan ini menghindarkan kalajengking dari titik tamat seperti QUASR boleh mudah diawasi oleh mata manusia dan penapis plastik berwarna. Cerakin lampu lebih menyeluruh berbanding dengan mata manusia. Wujud untuk semua telefon pintar adalah fungsi mengimbangi warna yang dinamik, yang dioptimumkan untuk fotografi dan sekali gus memperkenalkan perubahan dalam parameter pengesan untuk disesuaikan dengan keadaan persekitaran yang dinamik. akan menghalang perhimpunan seluruh sistem kami, menyekat sebarang cahaya ambien dan seterusnya memberi pencahayaan LED yang diulang. Sebaik sahaja dioptimumkan untuk satu cerakin, parameter ini boleh disimpan, membolehkan semua aktiviti di bawah seterusnya harus dilakukan dengan seting sama. dikendalikan lampu kotak untuk pengesanan serentak ZIKV, CHIKV dan DENV. Sayuran untuk diskriminasi many serotip.
Lipat lebihan berbanding dengan ZIKV dan sebaliknya, mencadangkan bahawa QUASR pensuisan adalah mampu mengesan coinfections. Kerana aktiviti di bawah ini CHIKV dan DENV adalah berdasarkan set asas yang sebelum ini diterbitkan, kami tidak mencirikan mereka secara meluas seperti yang kami lakukan dengan cerakin ZIKV baru kami. pelarasan kamera parameter oleh telefon pintar, pemberian manual kawalan ke atas tumpuan panjang, masa pendedahan, dan ISO kanta sensor CMOS menghapuskan apa-apa perubahan dalam isyarat pelepasan. RNA setiap virus telah digunakan dalam setiap tindak balas yang ditunjukkan oleh tanda plus. Tiada kawalan template ditandakan dengan tanda negatif. Biru terang dari RGB LED dan ditapis imej telah diperolehi oleh aplikasi LAMP2Go.
Imej-imej yang dianalisis kemudiannya dipetakan lebih ditentukan fluorophore pelepasan Pulau-pulau CIE] dengan Rajah chromaticity, jelas membezakan aktiviti di bawah sasaran virus yang berbeza. DENV1 virus RNA sasaran ditunjukkan di sini. sensitiviti yang sama sebagai alat NAAT benchtop. Utuh ZIKV telah digunakan sebagai sasaran dalam aktiviti di bawah ini. cahaya untuk memilih piksel.
Untuk kegunaan dalam sistem telefon pintar kami, kami memperkenalkan algoritma pengesanan kolorimetri novel, yang menganalisis imej ini menghindarkan kalajengking dari dari sensor CMOS telefon pintar. Sehingga kini, pengesanan ini menghindarkan kalajengking dari titik tamat dengan aktiviti di bawah seperti QUASR telah bergantung kepada perbezaan dalam keamatan aktiviti RGB mentah antara isyarat positif dan negatif.